产品展示
PRODUCT DISPLAY
技术支持您现在的位置:首页 > 技术支持 > 使用超滤离心管时,需要注意的事项

使用超滤离心管时,需要注意的事项

  • 发布日期:2022-07-07      浏览次数:193
    •    超滤离心管是一种利用离心技术,用于生物样品的分离和制备的管状试样容器。通过离心机高速旋转提供的巨大离心力,使液体中的微小颗粒沉降,从而和溶液分离。离心管由高质量的透明高分子材料聚丙烯制成,广泛应用于多种试验操作,满足生物分析级要求。
        
        使用超滤离心管时,需要注意的事项:
        1、选择合适的超滤管。通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量为35kDa,就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。若目的蛋白分子量为10kD左右,则可以用截留分子量3kD的超滤管。认真阅读使用说明书,注意超滤膜对各种化学物质的耐受程度有所不同。
        
        2、新买来的超滤是干燥的,使用前加入超纯水,水量*过膜,冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超过管顶的白线为准。操作要轻,加入蛋白液前,超滤管需要插在冰上预冷。
        
        3、直接损坏超滤膜。开始离心超滤(离心机预冷至4度)。不同离心机的转速rpm换算成g之后,有所不同。离心机的加速度调至Z低档,减小对膜的压力。注意,一定要等离心机达到目的转速之后,方可离开离心机,否则离心机出问题时,无法第一时间处理。膜与转轴的方向根据说明书调整(角转离心机的情况是膜与轴垂直)。在实际使用中,一般转速开的比说明书里的要低,这样可以延长离心管的使用寿命。
        
        4、当浓缩到剩下1ml时,取50ul缓冲溶液,加入10ul流穿,看有没变蓝色,以此判断超滤管是否漏掉蛋白。如果管漏了,将上层和流穿重新倒入新管中开始超滤。要精确判断是否漏管,用5mgml的BSA离心10min,再取流穿,跑蛋白胶或Bradford粗测,继续加入剩下的蛋白液浓缩(在冰上操作,防止蛋白受热),直到所有浓缩液都加完为止。离心过程中注意是否发生蛋白沉淀,导致堵管。若发生沉淀,要确定沉淀的具体原因,是蛋白浓度过高还是Buffer不合适;前者可用多根超滤管同时超滤,降低浓度的办法解决,后者的方法是换不同的缓冲溶液,直到蛋白不发生沉淀为止。
    联系方式
    • 电话

      13061661322

    在线客服
    关注我们